Information om beredningen av kolloidala guldlösningar för antigentestet

Beredningen av en kolloidal guldlösning för antigentestet antar metoden för trisodiumcitratreduktion för att framställa en kolloidal guldlösning. Ta 1000 ml ultrapure -vatten och värma det till kokning på en magnetisk omrörare, tillsätt 40 ml 1% kloroaurinsyralösning, när lösningen kokar igen, tillsätt snabbt 36 ml 1% trisodiumcitratlösning, fortsätt att koka när färgen på lösningen svänger 5Min, stäng av värmare och återställer den ursprungliga volymen med ultrapy, efter att det är svalt. Medeldiametern och zeta -potentialen för kolloidala guldpartiklar mättes med en analysator för nanopartikelstorlek och lagrades vid rumstemperatur i mörkret. Så vad är informationen om beredningen av kolloidala guldlösningar för antigentestet? Låt oss ta en titt.

Här är innehållslistan:

l Förberedelse av kolloidalt guldmärkta konjugat

l Beredning av snabba antigen testremsor

l Minsta detektionsgräns

L Stabilitetstest

Förberedelse av kolloidalt guldmärkta konjugat

Ta 100 ml antigentestkolloidalt guld i två rena bägare, enligt de optimerade markanta pH-förhållandena, tillsätt 3,3 ml och 2,1 ml 0,1 mol/L kaliumkarbonat för att justera pH, rör med en magnetisk omrörare vid 300 R/min i 10 min, och tillsätt mus-anti-N-protein monoklonal och dnp-BSA-BSA-prote-prote-protein; 2 ml 10% BSA -lösning tillsattes och 2 ml 10% BSA -lösning tillsattes och omrörningen fortsatte i 20 minuter; Efter omrörning överfördes antigentestkolloidal guldlösning till två 50 ml centrifugrör, uppsättning av centrifugparametrarna var 9000 R/min, 20 min och 4 ° C, och centrifugering utfördes. Efter centrifugering, ta ut centrifugröret noggrant, skaka inte, ta bort supernatanten med en pipett, samla fällningen, rekonstituera den med konjugat utspädningsmedel till 10 ml och förvara vid 4 ° C i mörkret. Medeldiametern och zeta -potentialen för antigentestkolloidala guldkonjugatpartiklar mättes med en analysator med nanopartikelstorlek.

Beredning av snabba antigen testremsor

Provkudden var jämnt belagd med prov PAD -behandlingslösningen, och beläggningsmängden för varje glasfiber var 30 ml och torkades vid 50 ° C under 24 timmar. Dilute the rapid Antigen test colloidal gold-labeled mouse anti-N protein monoclonal antibody and colloidal gold-labeled DNP-BSA protein conjugate with conjugate diluent, the volume ratio is 18% and 20%, respectively, and treat with the diluted colloidal gold conjugate the coupler pad was uniformly coated with liquid, the coating amount of each glass fiber was 30mL, and it was dried vid 45 ° C under 24 timmar. Mus-anti-N-proteinmonoklonal antikropp och kanin anti-DNP-polyklonal antikropp utspäddes med PBS innehållande 0,01 mol/L pH7,4 och 5% trehalos till koncentrationen av 2,0 mg/ml respektive 1,0 mg/ml. När detekteringslinjen (T -linjen) och kvalitetskontrolllinjen (klin) belades fångstantikroppen på ett nitrocellulosamembran (NC -membran) och torkades vid 45 ° C under 48 timmar. Den beredda NC-filmen, konjugatplattan, provkudden och vattenbsorberande dynan klistrades in på PVC-bottenplattan i sin tur, skars i 3 mm/rand med en slitter, sattes i ett kortfodral och förpackades i en aluminiumfoliepåse. Under testet sätter du in nasofaryngeal swab i lyftröret som är fylld med extraktionslösningen (10 mmol/LPB, pH7.4, 1%NP-40), och tillsätt 3 droppar (100 ul) droppvis till provhålet på testkortet efter extraktion för 15-tal. 15 min reaktionstid för visuell tolkning. Antigen test T-linje och klin är båda positiva, t-linjen är inte färgad, klin är negativ, klin är inte färgad, vilket indikerar att testremsan är effektiv och den måste testas om igen.

Minimikatektionsgräns

Minsta detektionsgränsstudier utfördes med värmedödda viruskulturer. Eluatet från nasopharyngeala vattpinnar från friska människor användes som den negativa matrisen för antigentestet. Först utfördes en tiofaldig lutningspädning. Efter det negativa resultatet av det snabba antigentestet var den föregående koncentrationen sedan tvåfaldig gradientutspädning, och inte mindre än 19 gånger av 20 test var positiva. Koncentrationsnivån (≥95%) användes som minsta detektionsgränsen för reagenset.

Stabilitetstest

Placera det beredda antigentestet färdig reagenskort i en 50 ° C ugn och testa med höga och låga koncentrationskvalitetskontrollämnen varannan vecka. Upprepa testet 3 gånger för varje prov. Skillnaden i banddjupet mellan den höga temperaturen accelererade förstörelsereagens och kontrollreagenset under 1 vecka och 8 veckor.

Ovanstående är relevant information om beredningen av den kolloidala guldlösningen för antigentestet. Om du är intresserad av Covid-19 Rapid Antigen-testet , SARS-CoV-2 Rapid Antigen-test, kan du kontakta oss. Vår webbplats är www.bioteeke.cn.