Publicera Tid: 2021-11-08 Ursprung: Webbplats
PCR -maskin , även känd som PCR -genamplifieringsinstrument, PCR -amplifieringsinstrument, polymeraskedjereaktion Nukleinsyramplifieringsinstrument, är ett instrument som förstärker specifikt DNA med användning av PCR (polymeras -kedjereaktion) teknik. PCR -maskin används allmänt i medicinska och biologiska laboratorier, till exempel för att bestämma om en testkropp kommer att uppvisa PCR -maskiner används allmänt i medicinska och biologiska laboratorier, till exempel för att bestämma om en testorganism uppvisar en genetisk sjukdomsprofil, för att diagnostisera infektionssjukdomar, för att replikera gener och för att identifiera föräldraskap. Vad är en PCR -maskin?
Här är innehållslistan:
l Den grundläggande strukturen för en PCR -maskin
l Arbetsprincipen för PCR -maskin
l Reaktionskinetiken för PCR -maskinerna
En PCR -maskin består vanligtvis av en het täckningsdel, en termisk cykeldel, en transmissionsdel, en kontrolldel och en strömförsörjningsdel, etc.
Arbetsprincipen för PCR-maskinen liknar den naturliga replikationsprocessen för DNA, vars specificitet beror på oligonukleotidprimrar som kompletterar båda ändarna av målsekvensen, och består av tre grundläggande reaktionssteg: Denaturation-analing-extension.
1. Denaturering av mall -DNA
Mallen DNA upphettas till cirka 93 ° C under en viss tid för att dissociera det dubbelsträngade mall-DNA eller det dubbelsträngade DNA som bildas av en PCR-maskin för att göra det enkelsträngade så att det kan binda till primrarna i beredning för nästa reaktionsrunda.
2. Annealing (denaturering) av mall -DNA och primrar
Efter att mallen DNA denatureras till enkelsträngad genom uppvärmning sänks temperaturen till cirka 55 ° C och primrarna är parade och bundna till den enkelsträngade komplementära sekvensen för mall-DNA.
3. Förlängning av primrar
DNA-mall-primer-konjugatet syntetiseras under verkan av taqDNA-polymeras, med användning av DNTP som reaktionsmaterial och målsekvensen som mallen, för att syntetisera en ny halvbevarad replikerad strand komplementär till mallen DNA-sträng enligt principen för basparning och halvkonterad replikation.
Genom att upprepa denaturerings-anskaffande-utsläppsprocessen kan mer 'halvkonserverade replikatkedjor ' erhållas, och dessa nya kedjor kan användas som mallar för nästa cykel.
PCR-maskinen tar 2 ~ 4 minuter att slutföra varje cykel, och så vidare upprepade gånger kan DNA som produceras i varje cykel bli mallen för nästa cykel, och varje cykel förstärker kopieringsnummer av DNA-specifika regioner mellan två syntetiska primrar med 1-faldiga, och PCR-maskinen förstärker den exponentiella formen av 2. gen mer än 109 gånger efter 25 ~ 30 omgångar (2 ~ 3 timmar), och i praktiken kan den i allmänhet nå 106 ~ 107-faldig.
De tre reaktionsstegen för PCR -maskinen upprepas, vilket resulterar i en exponentiell ökning av mängden DNA -amplifiering. Den slutliga DNA -amplifieringen av reaktionen kan beräknas med användning av y = (1+x) n. Y representerar antalet kopior av DNA -fragmentet förstärkta, X representerar den genomsnittliga amplifieringseffektiviteten per amplifiering, och N representerar antalet cykler. The theoretical value of the average amplification efficiency is 100%, but in the early stage of the actual reaction, the increase of the target sequence DNA fragment is exponential, and with the gradual accumulation of PCR machine products, the amplified DNA fragment no longer increases exponentially, but enters the linear growth period or stationary period, ie, the 'stagnation effect', so that the average efficiency of the PCR machine reaches The PCR -maskinens genomsnittliga effektivitet når inte det teoretiska värdet.
Bioteke Corporation, som fokuserar på molekylär diagnostik och snabb detektion, särskilt på nukleinsyraktraktion, är en professionell högteknologisk tillverkare och PCR-maskiner. Det ligger i Wuxi City, Jiangsu -provinsen, Kina. Så vi ser fram emot att samarbeta med dig.